阴离子色谱柱是高效液相色谱仪的重要组成部分,其性能的稳定性和使用寿命直接影响到分析结果的准确性和实验效率。为确保其安全运行,需遵循以下操作与维护指南。
安全操作:
安装前检查:确认色谱柱的耐受pH范围、温度范围和最大压力,避免超范围使用。连接色谱柱时,确保管线接口无颗粒杂质,按色谱柱上标识的液流方向安装,并逐渐增加流量至工作流速。
流动相管理:使用高纯试剂和超纯水配制流动相,避免使用受到污染的水源。流动相需经0.45μm滤膜过滤,并采用在线脱气或超声脱气,防止气泡进入色谱柱。
样品预处理:样品需经0.22μm或0.45μm滤膜过滤,去除杂质。含有蛋白质的样品,需先沉淀蛋白质,再经固相萃取柱去除蛋白质和有机物。
操作规范:开泵后保持流量低于0.5mL/min,之后逐渐增加流量至工作流量。避免流动相长时间停流,防止固定相干缩或样品扩散至柱床深层。
维护保养:
日常清洗:每次使用后,用适当的溶剂清洗色谱柱,去除残留的样品和杂质。清洗时控制流速和时间,避免对色谱柱造成损害。
长期保存:长期停用前,用适当的溶剂充满色谱柱,防止空气中的氧气和水分进入。将色谱柱置于干燥、避光的环境中保存,避免阳光直射和高温环境。
定期检查:在保存期间,定期检查色谱柱的状态,如外观、密封性等。发现问题及时处理,以免影响后续使用。
再生处理:若色谱柱受到污染,可用组分相同且浓10倍的淋洗液清洗,或使用特定的清洗液(如0.1mol/L草酸清洗金属离子污染)。